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你身体里多能干细胞是否正常,你知道吗?


2018-10-14 11:04:57      来源:恒峰干细胞

人多能干细胞(hPSCs),包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞,在长期培养时容易出现复发性的遗传异常1-3。这些核型异常会改变干细胞的表现,损害其在疾病建模、药物筛选或细胞治疗中的可靠性。

您的多能干细胞是否正常?

复发性异常可使得对应的异常hPSCs产生选择性的生长优势,细胞增殖和存活能力都被增强,或自发性分化能力减弱。携带基因异常的细胞可迅速生长,超越培养物中基因正常的细胞(图1),影响研究的结果4,因此频繁定期检测hPSC的基因稳定性是极为必要的。




图1. hPSC基因检测试剂盒检测大约30%的嵌合现象

基因正常的WLS-1C人iPS细胞按照图中所示比例与含有一个20q染色体重复异常的WLS-1C人iPS细胞进行混合。与对照组(0%的嵌合异常)相比,具有约30%的非正常细胞表现出显著性的拷贝数异常(橘红色竖条)。

hPSC基因检测试剂盒包含的试剂可检测出70%以上报导过的核型异常。该基于qPCR的试剂盒通过双猝灭探针检测常见突变基因座最小临界区域的拷贝数,具有高度特异性及灵敏度。研究人员可通过试剂盒验证细胞培养的质量,提高实验结果的可信性。



如何设置hPSC基因检测试剂盒的实验?


图2. hPSC基因检测试剂盒检测出染色体20q11.21变异

使用(A)hPSC基因检测试剂盒检测出iPS细胞系WLS-4D1中染色体20q重复,而(B)使用 G显带并未测出,需要通过(C)荧光原位杂交(FISH)使用针对20q11(绿色)和20q11.21(红色)的探针证实。



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